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关于洗脱体积的疑难试题
作者:佚名    文章来源:本站原创    点击数:3900    更新时间:2007/3/23
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[一题]随着分子生物学的发展,人们越来越重视对蛋白质的研究。测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术,常用的测定方法是凝胶(由多孔性网状物质构成的颗粒,其孔能让小分子物质进出)过滤法,即在一根垂直的玻璃柱中装满凝胶,然后在其上端加入蛋白质混合液并用缓冲液进行洗脱。根据各种蛋白质洗脱的先后顺序可以比较它们的相对分子质量大小。不同蛋白质相对分子质量大小与洗脱体积的关系如图所示。

请回答下列问题:把含有肌红蛋白(相对分子质量为16900)、血清蛋白(相对分子质量为68500)、牛乳球蛋白(相对分子质量为35000)、牛胰岛素(相对分子质量为5700)的蛋白质混合液进行凝胶过滤,最先洗脱出来的是_______

 

http://sq.k12.com.cn/bbs/index.php?t=msg&th=243614

 

[另一题]测定蛋白质分子量是研究蛋白质的一项重要技术,常用的测定方法是凝胶(由多孔性网状物质构成的颗粒,其孔能让小分子物质进出)过滤法,即在一根垂直的玻璃柱中装满凝胶,然后在其上端加入蛋白质混合液用缓冲液进行洗脱,根据各种蛋白质洗脱的先后顺序可以比较它们的分子量大小.不同蛋白质分子量大小与洗脱体积的关系如下图所示.请回答

最先洗脱出来的是蛋白质分子量大的还是小的?另外,洗脱的物质是滤出的,还是存留的?

 

http://sq.k12.com.cn/bbs/index.php?t=msg&th=284277

http://bbs.tesoon.com/read.php?tid=99275

 

 

[资料解析] 凝胶过滤层析 凝胶过滤又称分子筛层析。这是根据分子大小分离蛋白质混合物的最有效方法之一。在凝胶过滤中,柱中的填充料是高度水化的惰性多聚物,最常用的是葡聚糖凝胶(Sephadex gel)和琼脂糖凝胶(Agarose gel)。凝胶颗粒是具有不同交联度的网状结构物,网眼大小可以通过交联剂与凝胶的比例来控制。不同型号的凝胶用来分离纯化不同分子大小的物质。在层析过程中,不同分子大小的蛋白质借助重力通过层析柱内的凝胶颗粒,比网眼大的蛋白质分子不能进入网格内,被排阻在凝胶颗粒之外,随着洗脱剂的流动首先流出;比网眼小的分子则进入凝胶颗粒内部,这样由于不同大小的分子所经路径距离不同而得到分离,大分子物质首先被洗脱出来,而小分子物质后被洗脱出来。

 

http://www.bicr.bjmu.edu.cn/detail.asp?ID=1736

 

我对曲线的理解:分子量越大,洗脱时消耗的洗脱液越少!

 

 

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