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实验十九 植物染色体核型分析
作者:生科院植…    文章来源:西北农林科技大学    点击数:3208    更新时间:2010/7/13
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一、目的和要求


    1. 初步掌握植物染色体制片技术,学习染色体显微摄影及放大技术。

    2. 分析染色体核型,计算有关数据。

二、仪器和材料

    显微镜,测微尺,毫米尺,镊子,剪刀,绘图纸,如无现成的染色体照片,需备显微摄影以及有关摄影器材;蚕豆、玉米、黑麦或水稻的根尖、幼花蕾,经固定、染色、压片、显微摄影所得染色体照片。

三、实验内容和方法

    1.测量和记录

    (1)计数:在显微镜下观察统计30个以上细胞染色体数目。方法是在镜下边观察边画简图,将一个细胞内染色体划分成几个自然分散区组,便于计数。其中85%以上的细胞具有恒定的染色体数目则可以认为是该个体的染色体数目。

    (2)拍照:选取5~10个染色体分散良好的中期细胞,进行显微摄相,同时将镜台测微尺在同样倍数下拍照。

    (3)冲卷与放大:为增加反差,可用D-19冲卷。放大前先用镜台测微尺底片效正放大机的放大倍数,例如镜台测微尺每一小格为1/100mm,欲放大1000倍,1/100×1000=10mm,测微尺每一小格放大10mm即为1000倍,这样可以得出照片的准确放大倍数。

    (4)排列:用剪刀沿放大后的染色体边缘将每个染色体剪下,用目测法根据染色体长短和形态特征,进行同源染色体配对,再按一定顺序将一个细胞内的染色体进行排队和编号。一般以最长染色体编号为1号,以下按长短顺序排列。相同长度染色体按短臂长度排列,短臂长的在前。

    2.染色体核型分析数据:按排列的程度进行染色体测量,并将测量数据填入表中。

    
    (5)配对:根据测量数据,即染色体相对长度,臂比,着丝点指数,次缢痕有无及位置,随体形状和大小等进行同源染色体的剪贴配对。

    (6)染色体排列:染色体对从大到小,短臂向上,长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上,有特殊标记的染色体(如含有随体)以及性染色体等可单独排列。

    (7)翻拍或绘图:完成上述步骤的染色体剪贴,可以通过翻拍摄影或描图成为染色体核型图。

四、课堂作业

    1.将测量数据和分析结果填入下表。

    注:
    (1)染色体分类:依据臂比,通常将染色体分为两点四区,即

    (2)核型公式:即综合核型分析结果,将核型的主要特征以公式表示。如核型为2n = 2x = 20 = 6m + 2sm + 2st( 2SAT ),即表示:有6个中部着丝点的,2个近中部着丝点的,2个近端部着丝点的,还有2个随体染色体。

五、思考题

    1. 请对洋葱体细胞染色体进行核型分析。

    2. 试说明染色体核型组成在植物系统分类中的作用和意义。

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