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5-4 微生物的营养 >>培养基
作者:广西民族…    文章来源:微生物课程    点击数:2304    更新时间:2009/12/5
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  培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖和产生代谢产物的混合养料。
一、培养基的设计和选用:
在微生物学研究和生长实践中,配置合适的培养基是一项最基本的要求。
1、 选择适宜的营养物质:

培养基的成分

  培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;
实验室的常用培养基:细菌:牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基);
放线菌:高氏1号合成培养基培养;
酵母菌:麦芽汁培养基;
霉菌:查氏合成培养基。
2、营养物质浓度及配比合适:
营养物质的浓度适宜;营养物质之间的配比适宜。高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑制或杀菌作用。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。
  3、物理化学条件适宜:pH、水活度、氧化还原电位等理化条件都需适宜。
  1)pH:培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。

  2)水活度:在天然环境中,微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。微生物不同,其生长的最适水活度不同。


一些微生物和一些食物的水活度

  3)氧化还原电位:
  氧化还原电位又称氧化还原电势(redox potential),是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标,其单位是V(伏)或mV(毫伏)。不同类型微生物生长对氧化还原电位(Ф)的要求不同,好氧性微生物:+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3~+0.4伏为宜; 厌氧性微生物:低于+0.1伏条件下生长; 兼性厌氧微生物:+0.1伏以上时进行好氧呼吸,+0.1伏以下时进行发酵。

  氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响。
  4、经济节约: 配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份, 特别是在发酵工业中,以降低生产成本。
  1).以粗代精  2).以“野”代“家”  3).以废代好  4).以烃代粮  5).以纤代糖  6).以氮代蛋

  5、精心设计、试验比较:
  进行生态模拟,研究某种微生物的培养条件;
  文献查阅,设计特定微生物的培养基配方;
  试验比较,确定特定微生物的最佳培养条件。

二、培养基的类型
  ①按化学成分的了解程度来分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基。
  ②按外观物理状态来分:
  液体培养基:用于大规模工业生产及摇瓶发酵。
  固体培养基:添加1.5-2%琼脂,用于分离、鉴定、计数、保藏。
  半固体培养基:加入0.2-0.7%琼脂:观察运动性,噬菌体效价测定等工作。
  ③按用途分:
  1)基础培养基(minimum medium):在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,也称为基本培养基。
  2)完全培养基(complete medium):在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是枯草芽孢杆菌等的完全培养基
  3)加富培养基和富集培养基(enrichment medium):在普通培养基(如肉汤蛋白胨培养基)中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等,用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物,或用于从环境中富集和分离某种微生物。
  4)鉴别培养基(differential medium):用于鉴别不同类型微生物的培养基特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。如EMB培养基即伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌, 在低酸度时,这二种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。

 

   5)选择培养基(selective medium):用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基,根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。

 

  如在分离放射线菌时加入3%重铬酸钾来抑制霉菌和细菌。
  培养基配制好后应立即灭菌,以免杂菌滋生,破坏营养、产生毒素。如暂不灭菌应放入冰箱内暂存。

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